مایکوباکتریوم توبرکلوزیس عامل بیماری سل امکان سنجی استفاده از توالی ژن card در تشخیص سریع باسیل

پایان نامه
چکیده

مقدمه : تشخیص سریع و شیمی درمانی مناسب اولین اقدام برای کنترل اپیدمی های سل است. در تشخیص بیماری سل، کشت نمونه بیمار (شامل خلط و یا نمونه های خارج ریوی)، با هدف اطمینان از وجود مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در نمونه انجام شده ، نقش مهمی در پروتکل درمانی بیمار ایفا می نماید. با این وجود این روش حدود 3 تا 6 هفته زمان می برد. استفاده از روشهایpcr جهت تشخیص سریع باکتریها وویروسها دارای حساسیت و ویژگی بالایی بوده و از دقت مناسبی برخوردار می باشد. بدین منظور کیتهای تجاری با هدف گذاری ترادف مشخصی از یک ژن اختصاصی، تولید و به بازار ارائه شده اند. در این طرح امکان سنجی استفاده از یک روش سریع و ساده بر مبنای pcr با کمک ژن card ارزیابی گردید. بدین ترتیب وابستگی به کیتهای تجاری مذکور مرتفع می شود. مواد و روشها : تعداد 40 نمونه از بیماران مسلول با علائم بالینی تائید شده و اسمیر و کشت خلط مثبت جمع آوری و dna آنها جداسازی شد. در این تحقیق برای انجام pcr ترادف خاصی از ژن card مایکوباکتریوم توبرکلوزیس جهت ارزیابی قدرت تشخیصی آن در یافتن این طراحی می شوند که بتوانند گونه مایکوباکتریوم توبرکلوزیس را از میان سایر باکتریها شناسایی نمایند. پرایمرها پس از سفارش ساخت در واکنش pcr استفاده شدند. واکنش pcr ست گردید.بدین معنی که مقادیر مواد مورد نیاز و نیز برنامه amplification تعیین شد. دراین طرح از سویه هایی که به روشهای کشت و بیوشیمیایی، مایکوباکتریوم توبرکلوزیس بودن آنها اثبات شده است (بعنوان استاندارد طلایی) استفاده می شود. بدین منظور سویه های حساس، مقاوم به دارو و سویه استاندارد h37rv مورد استفاده قرار گرفتند.واکنش pcr با کمک افزودن taq dna polymeraseو dntpوbuffer و پرایمرهای مذکور ست شده و برنامه pcr تعیین گردید. کلیه سویه ها با این روش pcr و الکتروفورز شدند. نتایج : تمام 40 نمونه بالینی مایکوباکتریوم توبر کلوزیس با کمک روشهای شناسایی معمول وکشت تعیین هویت شده و با کمک کیت pcr از نظر مولکولی اثبات هویت شدند. سپس در روش مورد استفاده در این تحقیق با پرایمرهای ژن ‍card مورد pcrقرار گرفته و باند 523 ارائه نمودند. نمونه های حساس، مقاوم به دارو و نیز سویه استاندارد، بصورت یکسان، باند مذکور را ارائه نمودند. بدین ترتیب انطباق کامل نتایج واکنش pcr انجام شده در این تحقیق با نتایج کیت pcr اثبات گردید. تعیین توالی انجام شده روی سویه ها، انطباق دقیق توالی بدست آمده از pcr با توالی موجود در بانک ژنی را نشان داد. نتیجه گیری : روش ارائه شده در این تحقیق قادر به افزایش سرعت عمل در تشخیص سل و کاهش خطاهای احتمالی در روش ذیل نلسون را بدنبال داشته و جهت استفاده روتین پیشنهاد می شود. باکتری در نمونه خلط مورد استفاده قرار گرفت. در روش pcr ، پرایمرها به گونه ای

منابع مشابه

ارزیابی حفاظت در ترادف ژن carD و استفاده از آن در تشخیص سریع مایکوباکتریوم توبرکلوزیس

زمینه: سرعت رشد سلولی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس وابسته به رونویسی rRNA است که در مایکوباکتریوم توسط ژن carD کنترل می-شود. هدف این تحقیق، ارزیابی حفاظت در ترادف ژن carD و استفاده از آن در تشخیص سریع سویه‌های کلینیکی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس با الگوی مقاومت آنتی‌بیوتیکی متفاوت است. مواد و روش‌ها: ژنوم تخلیص شده 38 سویه بالینی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس با الگوی مقاومت دارویی مختلف انتخاب شدند. پرایم...

متن کامل

ارزیابی حفاظت در ترادف ژن card و استفاده از آن در تشخیص سریع مایکوباکتریوم توبرکلوزیس

زمینه: سرعت رشد سلولی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس وابسته به رونویسی rrna است که در مایکوباکتریوم توسط ژن card کنترل می-شود. هدف این تحقیق، ارزیابی حفاظت در ترادف ژن card و استفاده از آن در تشخیص سریع سویه های کلینیکی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس با الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی متفاوت است. مواد و روش ها: ژنوم تخلیص شده 38 سویه بالینی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس با الگوی مقاومت دارویی مختلف انتخاب شدند. پرایم...

متن کامل

تشخیص سریع سل به روش ایمونودات با استفاده از آنتی ژن 38 کیلودالتونی مایکوباکتریوم توبرکولوزیس

Background and Aim: Tuberculosis is an infectious disease with worldwide distribution. Based on WHO report one third of people are affected with mycobacterium tuberculosis. Today, the traditional bacteriological methods are only available using diagnostic methods for detection of tuberculosis. Innovation of a simple and efficient method for the diagnosis of tuberculosis is one of the most impor...

متن کامل

تشخیص سریع موتاسیون در ژن عامل مقاومت به ریفابوتین در سویه های کلینیکی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس به روش Allele Specific PCR

Background and purpose: Molecular detection of antibiotic resistance in clinical strains of M.tuberculosis is of great importance. In this study, we developed a method for rapid detection of mutations resistant to the rifabutin antibiotic resistant gene. Material and methods: In this study 40 clinical isolates of M.tuberculosis including 12 resistant and 28 susceptible isolates to rifabutin we...

متن کامل

تشخیص سریع کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکلوزیس: روش PCR با استفاده از قطعه الحاقی 6110

Normal 0 false false false EN-GB X-NONE AR-SA MicrosoftInternetExplorer4 /* Style Definitions */ table.MsoNormalTable {mso-style-name:"Table Normal" mso-tstyle-rowband-size:0 mso-tstyle-colband-size:0 mso-style-noshow:yes mso-style-priority:99 mso-style-qformat:yes m...

متن کامل

شناسایی سریع گونه های مختلف مایکوباکتریوم ها در بیماری سل

بیماری سل میان انسان و دام مشترک است. در توصیف بیماری سل همین بس که ۲۰میلیون نفر مبتلا به آن در جهان وجود دارد و هر ساله 5میلیون نفر به اینرقم افزوده میگردد. مردم مناطق محروم جهان بیشترین قربانیان سل به شمار میروند. بیماری سل در گاو با ایجاد توبرکلهای پیشرونده در اندامهای مختلفبدن مشخص می گردد. علاوه بر گاو، انسان، بز و خوک نیز نسبت به آلودگی با عامل مسبب سل گاوی حساس بـوده و گوسفنـد و اسـب نوع...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشکی - دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی استان مرکزی - دانشکده پزشکی اراک

کلمات کلیدی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023